產品中心

當前位置:首頁>產品中心 >免疫印跡檢測系統 >蛋白檢測

極超敏ECL化學發光即用型底物

ECL化學發光底物

分類:

免疫印跡檢測系統 - 蛋白檢測

說明書:

AR1190

328元/25mlX2  

WB

WB輔助試劑

現貨

選擇規格:

總價格:

---

選擇數量:

- +

Product Brief

  • 產品概況

    產品貨號AR1190
    產品名稱極超敏ECL化學發光即用型底物
    價格規格¥328/100ml工作液(可用于500cm2的膜)

    溶液 A      25ml         

    溶液 B      25ml 

    保存條件4℃密封避光保存,一年有效
    產品說明

    博士德生產的極超敏ECL化學發光試劑盒,是一種基于魯米諾的增強型化學發光(ECL)HRP底物,發光效果顯著優于超敏ECL化學發光,可發出穩定的光信號,適用于通過CCD成像儀檢測中等飛克級的蛋白,當底物與優化的抗體濃度和封閉緩沖液配合使用時,可檢測到常規ECL底物無法檢測的低豐度靶蛋白及最佳發光持續時間。

    產品特點

    1.用于辣根過氧化物酶(HRP)的化學發光底物

    2.使用適當的一抗和二抗時,可在NC膜或PVDF膜上檢測豐度為中等飛克級的蛋白條帶

    3.所得信號的可定量檢測范圍跨越兩個數量級

    4.通過膠片或成像系統進行曝光,易于捕獲圖像

    5.配方經過優化,可適用于低濃度的抗體檢測

    6.用于辣根過氧化物酶(HRP)檢測的增強型化學發光底物,具有高靈敏度和長信號持續時間

    7.即刻生成穩定信號,可通過膠片或CCD成像系統方便地實現檢測

    8.工作液在24小時之內保持穩定;試劑盒可穩定放置長達1年

    注意事項

    1.A液和B液吸取過程中必須更換移液器槍頭,避免相互污染失效。

    2.A液和B液混合為工作液后,需避免強氧化劑如次氯酸鈉等對工作液的影響。

    3.須確保試劑瓶干凈,無微生物或其它試劑污染。

    4.為了您的安全,請穿實驗服并佩戴一次性手套。


Instructions

重要產品信息:

好的免疫印跡結果需要優化實驗條件,包括樣品量,凝膠類型,轉移方法,膜類型,封閉劑,洗滌緩沖液,一抗濃度,二抗濃度和孵育時間等。

1.為獲得最佳效果,在孵育步驟中使用搖床。

2.不要使用疊氮化鈉作為緩沖液的防腐劑,因為它會抑制HRP。

3.始終戴上手套或使用干凈的塑料鑷子。金屬裝置必須沒有可見的生銹痕跡,這可能導致斑點和/或高背景。

4.工作液暴露在陽光下或任何其他強光下都可能損害工作液使用效果。

5.由于阻斷劑與抗體的交叉反應性引起非特異性信號,所以實驗測試對于確定每種蛋白質印跡系統的適當封閉劑是至關重要的。阻止緩沖區也會影響系統的靈敏度。

6.當使用抗生物素蛋白/生物素系統時,避免使用牛奶作為阻斷劑,因為牛奶含有不同量的內源性生物素,導致高背景信號。

7.使用足夠量的洗滌緩沖液,封閉緩沖液,抗體溶液和底物工作溶液來覆蓋印跡并確保其永不變干。使用大的封閉和洗滌緩沖液體積可以使非特異性信號最小化。

8.將Tween-20洗滌劑(終濃度為0.05-0.1%)加入到封閉緩沖液和所有稀釋的抗體溶液中,以減少非特異性信號。

需要材料:

NC膜或PVDF膜

X射線膠片或成像系統

搖床

洗滌緩沖液:含有0.05-0.1%吐溫20的洗滌液,PBS:10mM磷酸鈉,150mM NaCl,pH7.2

TBS:10mM Tris,150mM NaCl,pH7.4

特異性的一抗,用洗滌緩沖液或封閉緩沖液稀釋

HRP標記的二抗,特異性針對一抗,用洗滌緩沖液或封閉緩沖液稀釋

封閉液:洗滌緩沖液中1-5%(w / v)封閉劑(例如酪蛋白,BSA或脫脂奶粉)

注意:博士德的ECL底物與所有封閉緩沖液兼容

使用說明:

1.室溫封閉膜60分鐘,同時搖動。

2.去除封閉液并添加一抗。在室溫振蕩培養1小時或在2-8℃過夜振蕩。

3.將膜懸浮于清洗緩沖液中搖動5分鐘以上。更換清洗緩沖液至少4-6次。增加洗滌緩沖液體積,洗滌次數和洗滌持續時間可能有助于使背景信號最小化。

4.在室溫下孵育二抗1小時,同時搖動。

5.重復步驟3,去除未結合的HRP結合物。

注意:與HRP結合物孵育后,膜必須徹底清洗。

6.通過混合等量的檢測試劑A和B來制備底物工作溶液。每平方厘米膜使用0.1mL工作溶液。

7.在室溫下用工作液孵育印跡膜1-2分鐘。

8.將印跡膜放在透明的保鮮膜或保護膜中。使用吸收性的紙巾去除多余的液體,小心地將氣泡壓出。

9.將印跡膜放在X光膠片或成像系統上顯色。底物孵育后的30分鐘內,發光最強烈。

疑難解答:

膜整個面都發光

酶標二抗量過多

減少二抗的濃度

膜上有棕色或黃色帶

發光時間短

低信號或無信號

抗原或抗體量不足

減少二抗的濃度

轉印失敗

優化轉印

二抗或底物活性低

更換二抗或底物

高背景

二抗濃度過高

降低二抗的用量

封閉不夠充分

優化封閉

封閉液使用不當

更換質量更好的封閉液

洗滌不夠充分

增加洗滌時間和次數

抗原或抗體濃度過高

降低抗原或抗體的用量

抗體特異性差

更換質量更好的抗體

條帶里有斑點

無效的蛋白轉移

優化轉印

不均勻的膜

更換質量更好的膜

轉印過程中膜膠之間有氣泡

小心的趕出氣泡

膜上有斑點

封閉液不均勻

過濾封閉液

非特異性的條帶

HRP標記的二抗濃度過高

降低二抗的用量

SDS引起的蛋白非特異性結合

不使用SDS

抗體特異性差

更換質量更好的抗體

封閉不充分

優化封閉

Related products

暫無相關產品
刘伯温6374cm刘伯温+开奖1 河南快三开奖走势 云南11选五任选走势 青海省十一选五最新开奖 云南快乐10分前三走势分布图 中国福得彩票快乐10分 好彩1生肖走势图 重庆幸运农场开奖官网 上海时时乐彩票网站 河北快三开始时间 smi理财平台 pk10走势图教程 香港五分彩是合法吗 投资理财平台力荐.中欧钱滚滚 安徽十一选五任五遗漏 快乐10分复式怎么玩法 股票开户哪个证券公司好